¿Qué es la
innmersión temporal?
Para saber qué es la innmersión temporal debemos tener en cuennta que es un sistema de cultivo semi-automatizado que ayuda a la propagación in vitro de plantas. Esto es muy esencial ya que está basado en el contacto intermitente del medio de cultivo líquido con las ex-plantes pero solo por un corto periodo de tiempo y la consecuente renovación de la atmósfera gaseosa, de esa forma se evita el desorden de los tejidos y la acumulación de algunos gases tóxicos.
¿Por qué es importante la inmersión temporal?
La inmersión temporal es clave ya que permite airear los tejidos de los brotes unido al contacto complejo de los mismos, de esa forma facilita una mayor penetración y asimilación de los nutrientes por los tejidos y como consecuencia aumenta el coeficiente de multiplicación y la calidad de los brotes.
Los SIT pueden ser utilizados para la producción de brotes vía organogénesis (desarrollo de los órganos) a escala masiva. De esa forma brindamos la posibilidad de automatizar algunas etapas del proceso de micropropagación, además ofrece mayor facilidad de escalado y con el objetivo de producir grandes volúmenes de plantas.
Componentes del sistema de inmersión temporal
El sistema de inmersión temporal está formado por dos frascos de cultivo, uno para el crecimiento de los explantes y el otro como reservorio de medio cultivo. Estos frascos están conectados entre sí por una manguera de silicona mediante conectores que atraviesan la tapa. En la parte interna de la misma se coloca una manguera menos flexible,
la cual desciende hasta el fondo de ambos recipientes. El medio cultivo circula de un frasco a otro en dependencia de la apertura o cierre de las electroválvulas, las cuales se conectan a un temporizador programable para así determinar la frecuencia y la duración de la inmersión. En la entrada de estos frascos se colocan filtros hidrofóbicos.
Tipos de sistemas de inmersión temporal
Al hablar de la inmersión temporal mencionaremos los distintos tipos de sistemas de inmersión temporal y la importancia que tiene cada una, algunos están patentados y otros son el resultado de del ingenio de los investigadores que pueden no tener los fondos para comprarlos.
Sistema Twin Flask
El sistema Twin-Flask se integra por un contenedor para plantas en crecimiento y un reservorio para el medio líquido. Cuando se abre una válvula solenoide y se gira el aire comprimido, el medio de cultivo también es forzado en el primer matraz y de esa forma sumergiendo las plantas. Este proceso ayuda a invertir cuando se abre otra válvula solenoide y la presión del aire regresa el medio de cultivo al depósito inicial.
Sistema RITA
El sistema Twin-Flask se integra por un contenedor para plantas en crecimiento y un reservorio para el medio líquido. Cuando se abre una válvula solenoide y se gira el aire comprimido, el medio de cultivo también es forzado en el primer matraz y de esa forma sumergiendo las plantas. Este proceso ayuda a invertir cuando se abre otra válvula solenoide y la presión del aire regresa el medio de cultivo al depósito inicial.
Frascos Nalgene
Este sistema se aplicó al principio de un sistema de filtración de polisulfona Nalgene. Es reutilizable al conectar cada uno de las dos divisiones con un tubo, que esté equipado con un filtro de 22um. A través de este se adhiere presión y de esa forma se impulsa el medio cultivo a la división superior que aloja los explantes. La salida en la parte superior del recipiente, permite que la presión salga y el aire consiga entrar al recipiente logrando filtrarse a través de un filtro de jeringa estéril.
Plant Form
El sistema Plant Form es elaborado en policarbonato transparente. Una canastilla con orificios de 1 mm de tamaño se ubica sobre una cámara que verifica el flujo del medio y aguanta el material vegetal. Un marco con cuatro patas se coloca sobre la canastilla para evitar que suba cuando se aplica coacción del aire al biorreactor.
La construcción y la posición de la canastilla se realizan de manera que las plantas solo se hunden en el medio líquido cuando se aplica presión de aire al biorreactor. Además, esta tiene tres perforaciones especialmente diseñados provistos de sellos de silicona que están acomodados firmemente dentro de las perforaciones.
Ventajas y desventajas de la inmersión temporal
A pesar de que la inmersión temporal tiene muchos beneficios, también es importante tocar las ventajas y desventajas que presentan. Una de las ventajas es que incluye facilidad de planificación, esterilización y manipulación, mayor velocidad en la absorción de sustancias nutritivas y la expansión de sustancias tóxicas producidas por el metabolismo de las plantas.
Sin embargo, en condiciones estáticas provoca un resultado depresivo sobre el desarrollo del tejido en el cultivo in vitro, ya sea por hipoxia o por hiperhidricidad. Para esquivar este problema, se han diseñado recientes tipos de biorreactores y sistemas semi-automatizados de cultivo líquido establecidos en la inmersión parcial y temporal de los explantes.